Leica DMI5000M显微镜操作规程
该仪器配有三种观察方法：即明场、暗场和偏光
1：明场操作
接通显微镜控制器电源，显微镜开始初始化，初始化结束后液晶显示屏上显示机器所处状态（如明、暗场，倍数，亮度等）。按显微镜左侧调焦手轮后侧最上方的按键进入明场模式，放上样品，根据各人要求调节目镜之间的距离和屈光矫正数值（即看清楚目镜里的测微尺）。先选择低倍物镜，适当调节灯泡亮度（灯泡亮度调节有两处：一种是通过调节显微镜机身左侧的标有INT的两个黑按键调节灯泡的实际亮度；另一种是通过孔径光阑（即显微镜机身左侧的标有AP的按键）来控制光透过的多少来改变），通过调节焦距找到观察区域，再换到适当倍数的物镜下微调焦距至看清样品（物镜倍数的选择通过按显微镜右侧的调焦手轮后的上两个按键，分别为由低倍到高倍和由高倍到低倍），通过载物台右边的螺杆前后左右移动样品至目标位置。如需要看白光，在显微镜后方左侧有一长方形黑色滤片架，可以将其推入或拔出光路（可以看到白光就行）。 （注意：此模式下应把起偏器和检偏器都拔出光路）。
2：暗场操作
按显微镜左侧调焦手轮后侧由上至下第二个按键进入暗场模式， 其余同上。 （注意：此模式下应把起偏器和检偏器都拔出光路）。
3：偏光操作
按显微镜左侧调焦手轮后侧最下面的按键进入偏光模式，再将起偏器和检偏器分别插入光路，其余操作同上
4：关于照相
在显微镜右侧有一拉杆控制光线是否经过左侧出口进入照相部分，因此如不能在电脑屏幕上显示图像时先检查一下该拉杆位置是否正确（拔出时有光线进入数码机， 推进时没有光线进入数码机），为确保图像色彩还原真实性请使用白光。
双击桌面图标Leica QWIN V3进入软件主界面，点击主菜单image下的image preview进入图像预览界面（如进入预览界面提示没有相机连接时请点击主菜单configure下image source select进入图像来源设置，检查是否选择了leica dfc280……leica dfc480），在该界面下适当调整各参数得到一幅较好的图像后就可点击acquire就可以将图像采集到主界面下，此时再点击主菜单file下的save as将图像保存。保存好原始图像之后就可以对现在的这幅图像进行一些处理并作相关测量。
关于图像预览界面：可调节曝光时间(exposure time)或亮度(brightness)（手动曝光时可控制曝光时间，自动曝光时可控制亮度）已得到比较好的图像（在“增益gain”下方的矩形框里可以看到柱方图均布于中间区域），按“采图acquire”右边的按钮可以进行颜色的自动调整，在“增益gain”下方的矩形框里有三个小三角形，通过调节三角形的位置可以改变图像的对比（通常中的三角形位置应在0.5至1.1之间，具体应取决于样品性质）。通过鼠标右键选择所拍照片的分辨率，及照片类型彩色还是黑白。调整好以上参数后点“采图acquire”按钮将图拍下。
5：关于测量
为保证测量的准确性必须知道图片是在多少倍的状态下拍照下来的，故建议拍照前在软件主界面点击peripherals下的select lens,在弹出的窗口里选择与实际使用对应的物镜倍数，当然也可以在拍好图片以后再来选择，为避免漏选最好还是拍图前选择。
在选择好物镜倍数后就可对图像进行一些处理后自动测量或直接测量。
a、直接测量：主要是指测量一两个说少数目标的参数，且测量要求不太高时可采用。具体如下：点击主菜单measure 下的measure interactive,在弹出的窗口里点击params进入下一窗口将你需要测量的参数打勾，ok后退出，如测量面积就选draw area，然后在目标对象上手动画出来同时结果就会显示出来。
b、自动测量：适用于测量目标较多，如对一幅图中的相同色彩的所有目标进行测量。
具体如下：点击主菜单image 下的detect，在弹出的窗口里将accumulate打勾，然后用鼠标左键点击你要测量的目标，软件会自动将相同色彩的目标全都选上，如果你点错了目标可以再点击鼠标右键取消最近一次操作，选择好目标后将之输出到（该窗口右下方的output binary下选择）二进制图，然后再进行二进制图处理（点击主菜单binary下的下拉菜单对其进行处理，每次输出最好不要和输入相同，这样如果处理不好还有机会反悔）。二进制处理结束后就可以进行测量了，点击主菜单measure下的measure feature，在弹出的窗口里选择最后一次二进制图的名称，点击measure结果就会在新的窗口里弹出，可以将其拷贝到excel里。
6：关于标注
点击主菜单edit下的annotate下的show annotation tools，弹出标注窗口，可对图像进行标注，退出时选择hide annotation tools，但是要注意：标注和原图不在同一个图层，如果你想标注和原图一起保留，请在退出标注窗口之前将其合并，点击主菜单edit---annote---merge annotation with image，然后按提示操作。
7：注意事项：
1) 使用完毕后应待灯箱冷却后盖上防尘罩，100瓦灯泡发热量大，会烫伤防尘罩；
2) 操作过程中若未能看到样品或电脑无图片显示，请检查各处分光拉杆位置；
3) DFC320若长期不用（如一个星期）应置于干燥器中以防发霉；
4) 显微镜本身要注意以下内容：
a) 防尘：工作结束，要盖上防尘罩，以防止灰尘污染。灰尘与松散的污粒可用软毛刷或不掉毛的棉布清除。
b) 防渗剂：顽固的污物可用干净的棉布蘸上普通水溶液、汽油或酒精擦掉。不可使用丙酮、二甲苯或硝基稀释剂。
c) 防酸碱溶液及腐蚀性物质：用酸、碱或其他腐蚀性化学品工作时要特别小心。始终要避免光学系统或支架与这类化学品接触。强烈建议每次使用之后要进行彻底的清洁。
d) 防油：先用一块干净的棉布轻轻地擦掉浸油，然后用乙醇轻轻擦拭几次。
e) 物镜切不可拆开来清洁，透镜上的灰尘，用洗耳球吹掉。
f) 使用完设备及时登记使用情况。
材料设计与应用工程研究中心
2007年7月15日
